陈川海外研修年度总结

        一、教学学习

        我每周在弗洛里达州立大学医学院参加学术交流会议，还旁听了微生物学课程。我深入课堂学习，并在课后与教学老师交流了教学方法，并随机参访学生对课堂感受。我从课堂的形式和讲解方式全面了解了佛罗里达洲立大学的教育方法。教师以引导的方式进行教学，并随时提出问题让学生思考，课后还要求学生对问题进一步的探讨，探讨内容也就是课后布置的作业，并且每节课的作业成绩会影响学分，这就要求学生每节课都要迅速掌握所学内容；这边学生积极思考，可以打断老师进行提问，课上的互动和思维都比较活跃，学生提问的问题也比较前沿，这说明课前或者平时积累了大量的相关知识。通过旁听课程，我很有收获，这次美国教学学习可以很有效的促进国内教学。

         二、专业研究——利用酵母表达舞蹈病蛋白研究真核细胞自噬

        许多人类疾病与蛋白质降解受损有关，包括阿尔茨海默病、帕金森病、亨廷顿病、肌萎缩性侧索硬化症，还有包涵体肌病与佩吉特病骨和额颞痴呆（IMPFD）有关。IBMPFD是由Cdc48内的突变引起的，这些突变与由聚集蛋白组成的细胞内包涵体，最显著的是TDP-43。虽然最初认为蛋白聚集是UPS中Cdc48功能受损的结果，但是现在很清楚突变的Cdc48导致自噬缺陷导致聚集物的积累。CDC48是一种必需的、ATP驱动的细胞内蛋白降解关键蛋白。在真核细胞中。Cdc48的生理功能存在于许多细胞过程中，例如细胞周期进程、同型膜融合、染色质重塑、转录和代谢调节等。Cdc48最终以蛋白酶体或自噬介导的溶酶体的蛋白水解连接途径结束蛋白降解。CDC48的细胞功能在很大程度上取决于调节辅助因子。辅助因子定义其中Cdc48起作用的途径，同时结合底物处理因子定义蛋白质在途径中摄取的目的地，例如底物是被加工还是降解。目前CDC48及其辅助因子对细胞内聚集蛋白自噬作用还不是很清楚， Htt103QP -GFP为舞蹈病蛋白在酵母中经过乳糖诱导后在细胞内形成绿色聚集体，形成聚集体后在加入葡萄糖可以促进细胞的自噬，通过构建缺失不同的辅助因子的酵母细胞，研究对自噬的影响。绿色为Htt103QP -GFP突变蛋白，加入葡萄糖3h后，绿色蛋白在液泡聚集，证明有自噬发生，如果没有聚集证明没有自噬发生。我们选取了15个辅因子利用酵母表达舞蹈病蛋白研究细胞自噬，发现4种辅因子对自噬有影响(图1)。目前正在研究其机理。

      多囊泡体（MVB）是由膜内芽形成的充满管腔内囊泡（ILV）的内质室。MVB的含量可以通过溶酶体融合或从细胞中导出，通过与质膜融合释放外体。ESCRT机制对泛素化膜蛋白的分类和MVB室中ILV的形成至关重要，它由四个异质多聚体复合物ESCRT-0到III组成。此外，许多辅助蛋白与ESCRT复合物有关。目前提出的ESCRT复合物功能模型：首先由Vps27p/HRS和Hse-1形成的ESCRT-0专门用于在内质膜上形成泛素化蛋白的货物。随后，ESCRT-0通过Vps27p/HRS与Vps23p/TSG101的直接相互作用招募ESCRT-I，ESCRT-II通过Vps36p/EAP45与Vps28p的结合与ESCRT-I相互作用。然后形成ESCRT-III复合物的寡聚化是膜断裂释放ILV所必需的。最终，ILV在与溶酶体融合后降解。我们选取了ESCRT复合物的关键蛋白基因进行缺失，以观察MVB途径对突变的舞蹈病蛋白自噬的影响。Htt103QP -GFP为舞蹈病蛋白在酵母中经过乳糖诱导后在细胞内形成绿色聚集体，形成聚集体后在加入葡萄糖可以促进细胞的自噬，通过构建缺失不同的MVB关键蛋白缺失的酵母细胞，研究对自噬的影响。绿色为Htt103QP -GFP突变蛋白，加入葡萄糖3h后，绿色蛋白在液泡聚集，证明有自噬发生，如果液泡没有聚集证明没有自噬发生。我们选取了5MVB关键蛋白，发现MVB对自噬有影响(图2)。具体机制在研究中。

        通过这次访学经历，取得了很多收获，在教学和科研上得到了训练，回国后继续消化和整理这次访学经历学的知识，争取今后在河北大学的教学和科研工作中再创佳绩。